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常用的幾種細(xì)胞凋亡檢測方法介紹
更新時間:2018-07-09 點擊次數(shù):1242次
  
  
  細(xì)胞凋亡是指由基因控制的細(xì)胞自主有序死亡的主動過程,涉及一系列基因的激活、表達(dá)以及調(diào)控等的作用。針對凋亡時期不同,檢測的方法有所不同。
  
  細(xì)胞的凋亡與壞死是兩種*不同的細(xì)胞凋亡形式,根據(jù)死亡細(xì)胞,在形態(tài)學(xué)、生物化學(xué)和分子生物學(xué)上的差別,可以將二者區(qū)別開來。細(xì)胞凋亡檢測方法有很多,下面我們來介紹以下幾種我們常用的測定方法。
  
  (一)細(xì)胞凋亡的形態(tài)學(xué)檢測
  
  根據(jù)凋亡細(xì)胞的一種固有的形態(tài)特征,人們已經(jīng)設(shè)計許許多多不同的細(xì)胞凋亡形態(tài)學(xué)檢測方法。
  
  1光學(xué)顯微鏡和倒置顯微鏡
  
 ?。?)未染色細(xì)胞:凋亡細(xì)胞的體積變小、變形,細(xì)胞膜完整但出現(xiàn)發(fā)泡現(xiàn)象,細(xì)胞凋亡晚期可見凋亡小體。
  
  貼壁細(xì)胞出現(xiàn)皺縮、變圓、脫落。
  
 ?。?)染色細(xì)胞:常用姬姆薩染色、瑞氏染色等。凋亡細(xì)胞的染色質(zhì)濃縮、邊緣化,核膜裂解、染色質(zhì)分割
  
  成塊狀和凋亡小體等典型的凋亡形態(tài)。
  
  2熒光顯微鏡和共聚焦激光掃描顯微鏡
  
  一般以細(xì)胞核染色質(zhì)的形態(tài)學(xué)改變?yōu)橹笜?biāo)來評判細(xì)胞凋亡的進(jìn)展情況。
  
  3透射電子顯微鏡觀察
  
   結(jié)果評判:凋亡細(xì)胞體積變小,細(xì)胞質(zhì)濃縮。凋亡ⅰ期(pro-apoptosisnuclei)的細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)高度盤繞,出現(xiàn)許多稱為氣穴現(xiàn)象(cavitations)的空泡結(jié)構(gòu);ⅱa期細(xì)胞核的染色質(zhì)高度凝聚、邊緣化;細(xì)胞凋亡的晚期,細(xì)胞核裂解為碎塊,產(chǎn)生凋亡小體。
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