原位雜交是在DNA分子復制原理的基礎上發(fā)展起來的一種技術，兩條核苷酸單鏈片段，利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基順序，通過堿基對之間非共價鍵的形成，出現(xiàn)穩(wěn)定的雙鏈區(qū)，形成雜交的雙鏈。我們?yōu)榭蛻籼峁┑奶结樉涍^臨床驗證。
原位雜交是用于定位固定組織和細胞中特定核酸靶標的強大技術，能夠獲得與基因表達和遺傳位點相關的時間和空間信息。雖然
原位雜交的基本工作流程與印跡雜交近似，即核酸探針被合成、標記、純化和特異性靶標退火，但其不同之處在于前者可通過可視化顯示組織內的結果來獲得更多信息。如今有兩種基本方法來實現(xiàn)可視化顯示原位RNA和DNA靶標，即熒光(FISH)和顯色(CISH)檢測。每種檢測方法本身的特點使得FISH和CISH適用于截然不同的應用。雖然兩種方法均使用標記的、與樣本雜交的靶標特異性探針，但每種方法用于可視化顯示樣本的儀器不同。
原位雜交技術的基本原理是利用核酸分子單鏈之間有互補的堿基序列，將有放射性或非放射性的外源核酸(即探針)與組織、細胞或染色體上待測DNA或RNA互補配對，結合成專一的核酸雜交分子，經一定的檢測手段將待測核酸在組織、細胞或染色體上的位置顯示出來。為顯示特定的核酸序列必須具備3個重要條件：組織、細胞或染色體的固定、具有能與特定片段互補的核苷酸序列(即探針)、有與探針結合的標記物。
原位雜交的應用：
?、偌毎禺愋詍RNA轉錄的定位，可用于基因圖譜，基因表達和基因組進化的研究;
?、诟腥窘M織中病毒DNA/RNA的檢測和定位，如EB病毒mRNA、人類乳頭狀瘤病毒和巨細胞病毒DNA的檢測;
③癌基因、抑癌基因及各種功能基因在轉錄水平的表達及其變化的檢測;
?、芑蛟谌旧w上的定位;
?、輽z測染色體的變化，如染色體數(shù)量異常和染色體易位等;
?、薹至验g期細胞遺傳學的研究，如遺傳病的產前診斷和某些遺傳病基因攜帶者的確定，某些腫瘤的診斷和生物學劑量測定等。
