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卵巢癌耐藥細(xì)胞在體外培養(yǎng)半年以上,生長(zhǎng)穩(wěn)定
更新時(shí)間:2019-09-26 點(diǎn)擊次數(shù):1851次
   卵巢癌耐藥細(xì)胞的建立就是體外低濃度培養(yǎng)細(xì)胞,逐漸誘導(dǎo)耐藥??墒钦麄€(gè)過(guò)程耗時(shí)長(zhǎng),易受污染,成功率一般。后來(lái)了解到還可以通過(guò)裸鼠荷瘤的方式,給裸鼠腹腔注射藥物逐漸誘導(dǎo)耐藥,取瘤組織研碎制成細(xì)胞懸液在再培養(yǎng)幾代可得腫瘤細(xì)胞。這樣時(shí)間就縮短了很多~而且不受污染等條件限制。卵巢癌耐藥細(xì)胞的建立實(shí)驗(yàn)是通過(guò)細(xì)胞與低劑量的藥物長(zhǎng)期接觸,引起細(xì)胞本身生物化學(xué)過(guò)程的改變,細(xì)胞膜上出現(xiàn)Pgp(或P-170)糖蛋白,使細(xì)胞逐漸對(duì)藥物耐受。
 
  卵巢癌耐藥細(xì)胞通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的培養(yǎng)物稱(chēng)為耐藥細(xì)胞,卵巢癌耐藥細(xì)胞是用單細(xì)胞分離培養(yǎng)或通過(guò)篩選的方法,由單細(xì)胞增殖形成的細(xì)胞群。卵巢癌耐藥細(xì)胞的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個(gè)培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)傳代成功后即為細(xì)胞系,由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代,或傳代次數(shù)有限,可稱(chēng)為有限細(xì)胞系,如可以連續(xù)培養(yǎng),則稱(chēng)為連續(xù)細(xì)胞系,培養(yǎng)50代以上并無(wú)限培養(yǎng)下去。所以卵巢癌耐藥細(xì)胞是通過(guò)選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細(xì)胞。從培養(yǎng)代數(shù)來(lái)講,可培養(yǎng)到40-50代。如果不能繼續(xù)傳代或傳代數(shù)有限,稱(chēng)為有限細(xì)胞株;如果可以連續(xù)傳代,稱(chēng)為連續(xù)細(xì)胞株。對(duì)于人類(lèi)腫瘤細(xì)胞,在體外培養(yǎng)半年以上,生長(zhǎng)穩(wěn)定,并連續(xù)傳代的即可稱(chēng)為連續(xù)性株或系。
 
  卵巢癌耐藥細(xì)胞注意事項(xiàng):
 
  1、觀察細(xì)胞好在低倍鏡(4或5X物鏡)下進(jìn)行,否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度。看細(xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下。
 
  2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
 
  3、有些細(xì)胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。
 
  4、收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染,請(qǐng)及時(shí)與我們。
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