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免疫熒光分析技術(shù)靈敏度高,特異性強(qiáng)
更新時間:2019-10-26 點(diǎn)擊次數(shù):1820次

  免疫熒光分析技術(shù)是新發(fā)展起來的精密的免疫標(biāo)記檢測技術(shù),與傳統(tǒng)的酶聯(lián)免疫法及金標(biāo)法相比,免疫熒光分析技術(shù)靈敏度高,特異性強(qiáng),操作方便,不用放射性物質(zhì)作為標(biāo)記物,因此具有無放射性、標(biāo)記物穩(wěn)定、便于長期保存、試驗(yàn)重復(fù)性好、分析速度快、樣品用量少及標(biāo)準(zhǔn)曲線量程寬等優(yōu)點(diǎn)[1]。熒光分析法是測定物質(zhì)吸收了一定頻率的光以后,物質(zhì)本身所發(fā)射的光的強(qiáng)度。熒光的強(qiáng)度與物質(zhì)數(shù)量之間存在正比關(guān)系,可通過測定熒光的光譜和熒光強(qiáng)度,對物質(zhì)進(jìn)行定性或定量的分析。免疫熒光分析技術(shù)是目前生物醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中常用的快速分析技術(shù),在微生物、病毒抗原或抗體檢測、激素檢測、腫瘤標(biāo)志物等檢測領(lǐng)域具有廣闊的應(yīng)用前景。
  
  技術(shù)原理:
  
  免疫熒光細(xì)胞化學(xué)是根據(jù)抗原抗體反應(yīng)的原理,先將已知的抗原或抗體標(biāo)記上熒光素制成熒光標(biāo)記物,再用這種熒光抗體(或抗原)作為分子探針檢查細(xì)胞或組織內(nèi)的相應(yīng)抗原(或抗體)醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理。在細(xì)胞或組織中形成的抗原抗體復(fù)合物上含有熒光素,利用熒光顯微鏡觀察標(biāo)本,熒光素受激發(fā)光的照射而發(fā)出明亮的熒光(黃綠色或桔紅色),可以看見熒光所在的細(xì)胞或組織,從而確定抗原或抗體的性質(zhì)、定位,以及利用定量技術(shù)測定含量。
  
  免疫熒光測定的應(yīng)用:
  
  目前,時間分辨熒光免疫測定、熒光偏振免疫測定和熒光酶免疫測定都有全自動化測試的分析儀器,這些儀器具有試劑和樣本條碼識別系統(tǒng),能自動加樣、溫育、洗滌、分離、測定熒光強(qiáng)度、處理數(shù)據(jù)和報告結(jié)果。
  
  時間分辨免疫熒光測定應(yīng)用范圍十分廣泛,包括蛋白質(zhì)、激素(肽類激素、甲狀腺激素、類固醇激素等)、藥物、腫瘤標(biāo)志物、病原體抗原/抗體等;熒光偏振免疫測定特別適用于血清或尿液中小分子物質(zhì)的測定,目前已有數(shù)十種治療藥物和成癮藥物、維生素、激素及常規(guī)生化項(xiàng)目可用熒光偏振免疫測定進(jìn)行分析和定量測定;熒光酶免疫測定可用于多種抗原抗體的檢測,如病毒抗體、細(xì)菌及毒素抗原、激素、腫瘤標(biāo)志物、過敏原、心肌損傷標(biāo)志物和凝血因子等。
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