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熒光定量PCR在一定程度可以準(zhǔn)確反映疾病感染情況
更新時(shí)間:2020-03-19 點(diǎn)擊次數(shù):1258次
 
  
  熒光定量PCR技術(shù),顧名思義,就是在PCR的基礎(chǔ)上加入熒光基團(tuán),通過熒光信號(hào)的變化的實(shí)時(shí)監(jiān)測PCR的反應(yīng)過程,zui后通過對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
  
  目前,熒光定量PCR已成為不同樣品間進(jìn)行基因表達(dá)水平定量差異比較的權(quán)wei性方法。在過去十幾年中,該方法迅速流行,涉及科學(xué)的多個(gè)領(lǐng)域。
  
  DNA有著雙螺旋結(jié)構(gòu),當(dāng)溫度達(dá)到95攝氏度時(shí),雙鏈的DNA會(huì)分解成為單鏈狀態(tài),而在溫度到達(dá)72攝氏度左右時(shí),DNA聚合酶會(huì)沿著磷酸到五碳糖的方向進(jìn)行合成。聚合酶鏈反應(yīng)PCR就是通過不斷地調(diào)節(jié)溫度,以數(shù)量級(jí)的速度增加DNA數(shù)量的方法。而熒光定量PCR是指,在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)的變化實(shí)時(shí)監(jiān)測PCR擴(kuò)增反應(yīng)中每一個(gè)循環(huán)擴(kuò)增產(chǎn)物量的變化,通過Ct值和標(biāo)準(zhǔn)曲線的關(guān)系對(duì)起始模板進(jìn)行定量分析。
  
  PCR技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)藥食品等行業(yè),應(yīng)用于疾病的早期診斷、遺傳病的早期診斷、藥物研究、腫瘤的診斷與研究、食品病原微生物的檢測、轉(zhuǎn)基因食品檢測、動(dòng)物疫病檢測等,除此之外,還包括:
  
  1、基因擴(kuò)增;
  
  2、擴(kuò)增特異性分析;
  
  3、基因定量分析;
  
  4、基因檢測;
  
  5、基因分型;
  
  6、SNP分析;
  
  7、RFLP多態(tài)性分析;
  
  8、單/多基因表達(dá)研究;
  
  9、高通量基因表達(dá)譜研究等。
  
  大量的熒光定量PCR研究資料表明,病原體數(shù)量與感染性疾病病情的輕重程度、傳染性及治療效果均有相關(guān)性。因此,通過熒光定量PCR方法得到的檢測結(jié)果,一定程度上可以準(zhǔn)確反映疾病感染的情況。
  
  
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