亚洲超碰在线,东京热日本视频,中文字幕一三区在线,黑人操逼一区热区

當(dāng)前位置:

首 頁 > 技術(shù)文章 > 熒光定量PCR技術(shù)中引入的幾個重要概念
產(chǎn)品搜索 Search

技術(shù)服務(wù)Article

熒光定量PCR技術(shù)中引入的幾個重要概念
更新時間:2020-03-23 點擊次數(shù):1668次
 
  
  熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號累積實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對初始模板進(jìn)行定量分析的方法。它的出現(xiàn)解決了傳統(tǒng)PCR不能對初始模板定量分析的問題。具有準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)等優(yōu)點,目前已廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)研究和醫(yī)學(xué)研究等領(lǐng)域。
  
  熒光定量PCR結(jié)果分析:
  
  一般而言,熒光擴(kuò)增曲線可以分成三個階段:熒光背景信號階段、熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段和平臺期。在熒光背景信號階段,擴(kuò)增的熒光信號被熒光背景信號所掩蓋,無法判斷產(chǎn)物量的變化;在平臺期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級增加,PCR終產(chǎn)物量與起始模板量之間沒有線性關(guān)系,無法計算起始模板拷貝數(shù)。因此只有在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段,PCR產(chǎn)物量的對數(shù)值與起始模板量之間存在線性關(guān)系,故選擇在這個階段進(jìn)行定量分析。為了定量方便,在熒光定量PCR技術(shù)中引入了幾個重要的概念:擴(kuò)增曲線、熒光閾值、CT值。
  
  注:
  
  橫坐標(biāo):代表擴(kuò)增循環(huán)數(shù);
  
  縱坐標(biāo):代表熒光強(qiáng)度,每個循環(huán)進(jìn)行一次熒光信號收集。
  
  (2)熒光閾值(Threshold)
  
  在熒光擴(kuò)增曲線上人為設(shè)定的一個值,它可以設(shè)定在熒光信號指數(shù)擴(kuò)增階段任意位置上,但一般熒光閾值的設(shè)置是PCR反應(yīng)前3-15個循環(huán)熒光信號標(biāo)準(zhǔn)偏差的10倍。
  
  (3)CT值
  
  每個反應(yīng)管內(nèi)的熒光信號到達(dá)設(shè)定閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)。每個模板的Ct值與該模板的起始拷貝數(shù)的對數(shù)存在線性關(guān)系,起始拷貝數(shù)越多,Ct值越小。利用已知起始拷貝數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)品可作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,其中橫坐標(biāo)代表起始拷貝數(shù)的對數(shù),縱坐標(biāo)代表Ct值。因此,只要獲得未知樣品的Ct值,即可從標(biāo)準(zhǔn)曲線上計算出該樣品的起始拷貝數(shù)。同時,對于熒光PCR實驗來說,CT值也是判讀樣品陰陽性的重要指標(biāo)。
  
  
欧美无人小视频| 在线小穴视频| 秋霞网AV蜜桃| 国内熟女对白视频一区二区三区| 日韩一级老女人嗷嗷| 高清欧美在线| 97香蕉超碰在线| 午夜成人在线你懂的| 久久久嗯嗯啊啊啊| 亚洲天堂超碰| 日韩肏穴视频| 精品美女被操| 欧美逼逼穴| 国产高潮图片| 斗六市| 大香蕉蜜桃91| 亚洲裸体老女人| 欧美一区二区三区嫩妇| wuyueav| 一区二区三区四区五区中文 | aV。熟女。护士。一区。二区| 操美女骚逼大奶子视频| 国产日本综合大鸡巴| 俄罗斯精品无码视频| 后入国产区| 红桃AV在线无码国产| 百虎精品一区| 国产精品不卡冒白浆| 成人av免费在线观看| 人妻熟妇人妻日穴视频| 就在操在线视频| 我爱操啪啪中国人操美国黑人| 一区日韩高清| 丰满人妻妇伦又伦精品| 免费超碰在线观看| 日本中文字幕有码在线视频app| 久久婷婷美国| 午亱成人在线视频| 草原青青在线视频| 蜜乳人妻一区二区三区在线| 亚洲一区ab|