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關于耐藥細胞株的一些相關信息分享
更新時間:2022-04-18 點擊次數(shù):1578次
  耐藥細胞株構建的原理:
 
  細胞與低劑量的藥物長期接觸,引起細胞本身藥物化學過程的改變,細胞膜上出現(xiàn)Pgp糖蛋白,使細胞逐漸對藥物耐受,隨著藥物濃度的遞增,其耐受程度逐漸加強。
 
  耐藥細胞株基本共性:
 
  1、所有的細胞表面均有由磷脂雙分子層與鑲嵌蛋白質及糖被構成的生物膜,即細胞膜。
 
  2、所有的細胞都含有兩種核酸:即DNA與RNA。
 
  3、作為遺傳信息復制與轉錄的載體。
 
  4、作為蛋白質合成的機器—核糖體,毫無例外地存在于一切細胞內,核糖體,是蛋白質合成的機器,在細胞遺傳信息流的傳遞中起重要作用。
 
  5、所有細胞的增殖都以一分為二的方式進行分裂。
 
  6、能進行自我增殖和遺傳
 
  7、新陳代謝
 
  8、細胞都具有運動性,包括細胞自身的運動和細胞內部的物質運動
 
  耐藥細胞株操作流程:
 
  1、載體構建:將外源基因構建到合適的載體上,如需病毒轉染,則包裝病毒。
 
  2、篩選濃度測定:以14天細胞全部死亡的抗生素濃度為篩選濃度。
 
  3、細胞接種:轉染實驗前天接種細胞,各種細胞的平板密度依據(jù)各種細胞的生長率和 細胞形狀而定。
 
  4、細胞轉染:用構建好的載體(或包裝好的病毒)轉染目的細胞。
 
  5、抗生素篩選。
 
  6、鑒定篩選結果。
 
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