亚洲超碰在线,东京热日本视频,中文字幕一三区在线,黑人操逼一区热区

當(dāng)前位置:

首 頁 > 技術(shù)文章 > 分享細(xì)胞系的培養(yǎng)步驟
產(chǎn)品搜索 Search
目錄導(dǎo)航 Directory

技術(shù)服務(wù)Article

分享細(xì)胞系的培養(yǎng)步驟
更新時(shí)間:2022-09-27 點(diǎn)擊次數(shù):1040次
  細(xì)胞系是來自多細(xì)胞生物體的細(xì)胞群體,其通常不會(huì)無限增殖,但是由于突變,逃避了正常細(xì)胞的衰老,從而可以持續(xù)分裂的一種細(xì)胞的集合。
 
  因此,細(xì)胞可以在體外長時(shí)間生長。細(xì)胞系是研究多細(xì)胞生物體的生物化學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)的非常重要的工具,例如信號(hào)通路、腫瘤殺傷、細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、突變分析、基因表達(dá)、蛋白表達(dá)、細(xì)胞分化等等。此外,永生化的細(xì)胞系也已經(jīng)在生物技術(shù)中得到應(yīng)用,比如建立新來源、新突變的細(xì)胞系。
 
  培養(yǎng)步驟:
 
  1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL*培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
 
  2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
 
  1、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
 
  1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
 
  2.加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的*培養(yǎng)基終止消化。
 
  3.輕輕吹打細(xì)胞,*脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
 
  4.按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
 
  PS:若客戶收到2ml小管細(xì)胞,收到細(xì)胞后,用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右*培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進(jìn)行傳代(方法同上)。
 
  2、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
 
  方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 
  方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
 
  3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,進(jìn)行離心收集,1000RPM條件下離心8-10分鐘,去除上清,按凍存數(shù)量加入血清及DMSO,凍存比例為90%FBS+10%DMSO。
亚洲综合AV一级| 亚洲操妞视频网在线观看| 黄色成人在线| 亚男人操女人逼免费视频播放 | 人疌少妇一二三区| 鸡巴插入小穴video一区二区三区| 青青精品视频一区二区三区不卡| 景德镇市| 亚洲精品美女久久久| 人妻の中出| 国产又粗又大配频| 操逼骚逼骚逼骚逼| 东京热2024中文字幕| 亚洲图区偷拍自拍| 女人被男人操喯视频| AV超碰在线黄色| 国产毛片极品导航| 蜜桃视频一起草| 91大神糖哥视频在线播放网站| 香蕉日韩视频| 亚洲老熟女激情一区二区三区| 美女站着让别人捅| 日韩性爰视频网站| 嗯嗯用力操视频| 超碰αⅤ大香蕉蕉| 国产欧美少妇抽搐| 国产精品三级av及在线观看| 日韩精品大鸡巴抽插| 亚洲老妇一二三区| 老骚逼老熟妇| 操大鸡巴视频免费日本| 第一福利视频美女| 深夜精品一区| 从江县| 一本色道久久综合狠狠躁扁什么玩 | 黑人一极片视频呢| 91精品国产一区二区三大屁臀| 免费人妻不卡蜜臀av| 久久五月婷婷色播| 天天操天天日黄色大片| 啊啊啊啊啊啊二区|